稳态/瞬态荧光光谱仪 项目简介 爱丁堡是一家专注于生产和研发高性能研究级光谱仪的公司。其推出的FLS980和FLS1000是当前较为先进、功能强大、模块化搭建的稳态瞬态荧光光谱仪(图1)。 图1 FLS系列注于稳态及时间分辨光谱测试,具有超高的灵敏度。通过搭配适宜的组件和附件,可以满足荧光、量子产率、磷光、近红外、荧光寿命等一系列测试需求。根据测试需要,可设置不同的光源和不同的测试模式,表1列举了不同测试模式对应的数据采集技术: 表1 不同测试模式对应的光源和数据采集技术 除了爱丁堡的仪器,滨松的设备也常用来测试材料的荧光量子产率。滨松的绝对量子产率测试系统,测试波段覆盖从紫外到近红外短波区域。相比爱丁堡的PMT探测器,滨松产率设备配置的CCD探测器主要特点是多通道性,可读出一段光谱区域内的连续光谱,实现“全谱测定”,测试响应速度更快,特定波长范围下的相对检测噪音也低。 此外,日立FL系列荧光光度计、HORIBA的荧光光谱仪、爱丁堡FS5等等。不同光谱仪的组成复杂程度不同,但它们的基本结构是相似的:光源照射样品,样品发出荧光,探测器接收信号,光电流经处理得到相应数值。 样品要求 确定样品有荧光/磷光性能,样品要光激励下能发光,不然所有荧光类测试都没有意义! 对于发光在可见区的样品,最简单直观的就是紫外灯或者紫外暗箱照射下看看样品的发光。 一些荧光样品在uv365灯下的照片: 粉末样品:一般需要20mg以上,块状或薄膜样品要求基底尺寸在1*1cm-2*2cm之间。 溶液样品:5ml左右,可能有溶度猝灭、溶剂效应等因素带来的影响,所以浓度根据自己样品情况把控,不做要求。 (1)选择另测激发一定是在预约光谱的前提下,其它测试项目要测激发一定要附带预约上光谱。测过激发谱后一般选最佳激发位置来做后续测试。 (2)一定要测过先测过光谱的前提下再预约寿命、产率的测试!如未测过光谱,需同时预约光谱测试! (3)测量子产率时,固体样品用硫酸钡作空白样,溶液的样品以溶剂作空白样。所以溶液样品测产率需同时提供溶剂,具体是什么溶剂请在预约时备注清楚。 (4)变温测试都不接受易挥发、易腐蚀的样品,如高温下有危害性请提前告知。液体样品,一定要备注好溶剂是什么、膨胀系数多大(如果膨胀系数过大,低温下迅速结冰,会撑破比色皿)。 注意:我们测常规发射谱的光源就是氙灯,测寿命的激光器光源不适合来测光谱!有些材料只能在特定激光激发下才能产生荧光,其发射光谱需要特定波长的大功率激光器来测,就是激光诱导的荧光,建议在铄思百平台搜索:拉曼-荧光联用测试。像一些光催化、半导体材料等,可以考究下文献用的是什么光源,氙灯测试合不合适。相关测试大致说明如下,如有特殊需求和其它未尽事宜,可再联系荧光测试负责工程师。 结果展示 常规荧光测试-数据格式解读(2021年3月版) 包含以下测试的数据说明,可具体查看: 爱丁堡仪器:光谱、量子产率、荧光寿命、其它测试(简要) 爱丁堡仪器:FLS980 1、爱丁堡光谱 (1)保存的格式:源数据FS +图片(wmf等)+文本txt FS源数据,有电子狗不能打开,客户仅保存,留作测试记录; 图片直观体现测试参数信息:激发波长、狭缝信息、积分时间等; 文本数据直接使用作图;客户可origin等软件自行处理 (2)数据命名:注意大小写区分 发射谱:样品编号-EM-ex激发波长 激发谱:样品编号-EX-em监测波长 EM代表发射谱,ex代表所用激发波长 EX代表激发谱,em代表所用监测波长 (3)其它说明: 提供图片是为了让客户更直观看数据、参数信息,如图1; 一般来说,测试一个谱对应一张图,后文相同; 如果客户要求比较荧光强度的,所有样品可能集合在一张图保存 图1 (4)参考示例: 2、爱丁堡量子产率 (1)保存的格式:源数据FS +图片(wmf等)+文本txt FS源数据,有电子狗不能打开,客户仅保存,留作测试记录 (2)数据命名: 样品编号-QY-ex激发波长; QY代表产率测试,ex代表所用激发波长 样品数据和参比(背景)数据通常保存在一起,不分别保存! 提供图片是为了让客户直观看到产率结果、测试曲线形状(纵坐标取对数)、产率计算时积分选取范围(散射范围、发射范围),如图2: 图2 (4)参考示例: 3、爱丁堡荧光寿命 (1)保存的格式:源数据FL +图片(wmf等)+文本txt FS源数据,有电子狗不能打开,客户仅保存,留作测试记录; 文本数据直接使用作图;客户可origin等软件自行处理 (2)数据命名: a. 原始数据: 样品编号-decay-光源,如: 1-decay-340epled;2-decay-375epl;3-decay-nslamp;4-decay-uslamp; decay表示衰减曲线,包含FL和文本2个格式,一般不再附图 b. 测试参数信息: 样品编号-decay-canshu; 参数信息非常重要,验证光源、检测器和监测波长信息,如图3: 图3 c. 拟合后的数据: 统一用“fit”表示,一般不再给文本数据; 命名为:样品编号-decay-fit,如:1-decay-fit-1;1-decay-fit-2; 直接给拟合后的2张图,如图4、图5;两张图分别对应“-1和-2”; 图4显示拟合的曲线界面:拟合的曲线(绿色)、拟合的加权残差(紫色); 图5显示具体的拟合结果:拟合的寿命τ1 (τ2、τ3)和对应的占比 B1 (B2、B3),如有需其它拟合或者计算平均寿命,可另行处理。 图4 图5 (3)其它说明: 根据上述内容,数据至少有1个FL、1个txt和3张图片; 寿命遇到衰减不完全,或者测不出衰减信号的一般会附加说明; 荧光弱的样品测试曲线信噪比会比较差,也存在不适合拟合等情况。 (4)参考示例:(字母D大写小写同理) 4、其它测试(简单说明,具体以数据为准) 近红外相关测试:开了近红外探测器的,除上述标准会另加上“NIR”字眼; 参考示例:1-NIR-EM-ex340;1-NIR-QY-ex340;1-NIR-decay-exuslamp; 变温相关测试:变温相关测试,命名按前文,另加上“温度”字眼; 参考示例:1-100k-EM;1-100k-EX;1-100k-decay-uslamp 常见问题: 1.做荧光测试前必须了解的知识概要; 在铄思百平台可以搜索相关文章 2. 测光谱光源需要用到激光器的?荧光光谱仪测常规发射谱的光源就是氙灯,测寿命的激光器光源不适合来测光谱!有些材料只能在特定激光激发下才能产生荧光,其发射光谱需要特定波长的大功率激光器来测,即激光诱导的荧光。 像一些光催化、半导体材料等,可以考究下文献测稳态谱用的是什么光源,氙灯测试合不合适。如需要激光光源测光谱的请搜索拉曼-荧光联用测试,用拉曼设备测试激光诱导的荧光。 3. 样品一定先测稳态,再测量子产率、瞬态光谱?产率测试前,样品要测过光谱,不要没有测过荧光就要直接测产率。可同时预约“发射谱”+“量子产率”测试; 稳态谱的数据是寿命测试的必要条件,没有测过光谱的,不清楚监测波长的,务必选择发射谱测试。一般稳态谱和寿命用的激发波长是一样的,或者是相近波长的激光器。荧光寿命的监测波长通常是光谱峰位或根据样品发射机制来确定的。 4. 荧光寿命拟合结果的分析及如何运用origin快速拟合荧光寿命?在铄思百平台可以搜索相关文章 测试提示: 1.可开正规测试发票,附带测试清单。 2.有腐蚀性,毒性,或其他有危害性等特殊样品要事先告知测试人员,测试人员也要告知样品方哪些样品不能测或会对仪器产生损伤,测试后会对样品产生哪些变化; 3.客户需提供详细的样品资料,包括元素,主要成分和详细测试参数及条件。和测试人员充分讨论,商定最终测试条件; 4.测试人员与顾客通过QQ,微信或邮件沟通,出现测试纠纷,邮件或聊天记录将作为重要的仲裁依据;请加QQ和技术人员交流。QQ:82187958;微信:15071040697 5.杜绝测试、解析和合成违反国家相关法律法规的样品,一经发现将追究其法律责任。 |